기술응용자료
[응용자료 26] Agilent AdvanceBio Glycan Mapping컬럼을 이용한 N-linked Glycan 분석 크로마토그래피
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제조사 | Agilent(LC Column) | 첨부파일 |
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분석 개요
재조합 단일 클론 항체 치료제 (mAb)는 치료용 단백질의 종류 중 하나로, 효능은 mAb의 glycosylation 패턴과 관련이 있으며 지금까지 허가된 모든 mAb들은 Immunoglobulin G(IgG)이다.
사람의 IgG는 각각의 heavy chain에 위치한 하나의 보존된 N-linked glycosylation size를 갖고 있다.
N-linked Glycan은 번역 후 변이(post-translational modification)를 거치는 정교한 혼합물로서 매우 중요하다. 그러므로 약물 개발, 가공과 생산 과정 중에서 Glycoprotein의 상태를 확인하고 조절하는 것이 필요하다. 안전, 효율과 치료용 단백질의 serum 반감기 같은 요인들은 glycosylation 패턴에 영향을 끼칠 수 있다.
Glycan의 분석이 다양해지고 있으나, 주로 분석되는 방법은 2-aminobenzamide(2-AB) 시료를 이용하여 유도체화하여 형광으로 검출하는 방법이다.(그림 1.) 라벨이 붙은 glycan은 매우 친수성(Hydrophilic) 구조이고 이를 HILIC 컬럼을 이용하여 분석이 용이하다. 또한 HILIC컬럼을 사용하여 FLD(형광검출기)로 검출 가능하며, MS(질량분석기)를 사용하여 질량과 구조 정보도 얻을 수 있다.
분석방법 및 분석결과
< 제품 보기 : AdvanceBio Glycan Mapping Column >