기술응용자료

전처리 :  Silver-Ion SPE
사용 컬럼 : SP-2560, SLB-IL111

Trans Fat

트랜스지방은 지방분자에 이중결합이 포함되어있는 불포화 지방이다
반면에 지방을 구성하는 탄소원자들 모두가 단일결합으로 이루어진 지방은 포화지방이라고 한다.
많은 탄소원자를 포함하는 지방 혹은 지방산의 중간부분에 이중결합이 있다면 그 모양은 시스, 혹은 트랜스가 될 수 있다.
시스의 경우에는 이중결합을 중심으로 긴 사슬 모양의 탄소 뭉치들이 같은 방향으로 있어서 마치 영문자 “U” 자 모양을 유지하고 있다.
반면에 트랜스의 경우에는 이중결합을 중심으로 탄소 뭉치들이 약간 뒤틀려 보이지만 전체적으로는 포화지방처럼 길다란 막대기 모양을 유지하고 있다
불포화 시스 구조를 많이 가지고 있는 식물성 기름도 높은 온도에서 조리과정을 거치면서 불포화 트랜스 구조로 변환될 수도 있다

트랜스 지방이 심장병을 일으키는 원인을 제공한다는 의학 자료들도 있고, 몸에 트랜스 지방이 많은 여성들이 유방암에 걸릴 확률이 40% 이상 높다는 연구결과도 나와있으니 되도록이면 트랜스 지방을 멀리하는 것이 좋을 듯싶다. 하지만, 자연산 트랜스 지방(vaccenic acid)도 존재하고, 우리 몸에 필요한 식품들에도 들어 있으므로, 트랜스 지방을 전혀 먹지 않기란 불가능하고, 바람직하지도 않을 것 같다. 따라서 트랜스 지방의 하루 제한량(약 2.2g)을 지키려고 노력하는 것이 좋겠다. 

참고로 우리나라의 식품 표시기준에 따르면 1회 제공량 (과자의 경우 30g)에 0.2g 이하의 트랜스지방이 포함된 경우에는 천연적으로 존재하는 함량 등을 고려, "0"으로 표시할 수 있다. 이점은 미국, 캐나다 등도 비슷하다. 따라서, 트랜스 지방의 함량을 잘 살피되, 트랜스 지방이 없다고 표시한 식품이라고 해서 마구 섭취해서는 안된다.

Extraction and Derivation

1. Homogenize sample and weigh 1 g into a 50 mL round bottom flask. Add several boiling chips.

2. Add 5 mL of 1.3 M methanolic hydrochloride (HCl). Attach condenser and reflux for 15 min after mixture has started to boil.

3. Turn off heat, remove condenser and add 5 mL of 2.3 M methanolic sodium hydroxide (NaOH) to flask. Reattach condenser and reflux again for 15 min.

4. Turn off heat, remove condenser, and add 14 mL of 10% BF3-methanol. Reattach condenser and reflux for 5 min.

5. Turn off heat, remove condenser, and add 5 mL of hexane. Remove flask from mantle and let it cool to room temperature.

6. Add saturated sodium chloride (salt) solution (aqueous) to the flask until organic layer (top) is in the neck.

7. Stopper the flask and shake. Remove top later, pass through sodium sulfate bed and save for fractionation using Ag-Ion SPE.

Ag-Ion SPE Cleanup

1. Condition Ag-Ion SPE tube with 4 mL of acetone and allow solvent to drip completely through the tube

2. Equilibrate Ag-Ion SPE tube by passing 4 mL of hexane completely through the tube

3. Load 1 mL of sample extract onto the tube. Any eluant coming through the tube may be discarded.

4. Elute fraction 1 with 6 mL of hexane:acetone (96:4) and collect eluant. Be sure all solvent has been drawn through the tube. This fraction should contain any saturates, trans monoenes, and cis/cis and trans/trans conjugated linoleic acids (CLAs).

5. Elute fraction 2 with 4 mL of hexane: acetone (90:10) and collect eluant. Be sure all solvent has been drawn through the tube. This fraction should contain any cis monenes, trans/trans dienes, and cis/trans and trans/cis CLAs.

6. Elute fraction 3 with 4 mL of 100% acetone. This fraction should contain any cis/cis dienes, other dienes, and most trienes.

7. Dry each fraction down at room temperature using nitrogen, and reconstitute in 1 mL of hexane for GC analysis

Analysis on 100m SP-2560 and SLB-IL111 Column

AOCS 기준에 의하면 180℃ 에서 GC 등온분석을 요구하고 있다.

Cyanopropyl silicone 컬럼 (SP-2560)은 이 온도에서 최적화된 분리능을 나타낼수 있도록 제작 (Figure 2. SP-2560 Chromatograms)

SLB-IL111 : Ionic liquid 고정상으로 더욱 극성도가 높은 물질에 대해 SP-2560 보다 확실한 선택성을 갖고있다. 이 컬럼으로 cis/trans FAMEs 의 분석을 위해 최적화 온도 168℃ 에서 분석

(Figure 3. SLB-IL111 Chromatograms)